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“青春旅行团”王凯、吴谨言、林允、魏大勋、范丞丞、胡先煦、宋铭睿、段美洋全员出动，开启南京之行。本期节目，众成员化身“古代学子”，跟随“青春发起人”新浪微博范宇泽的步伐搭乘高铁，从杭州前往有“天下文枢”之称的六朝古都南京，体验古代学子在科举制度下求学赶考的生活。青年演员许凯更倾情加盟，“傅璎夫妇”再次合体。王凯接到神秘任务中途离队，他究竟去了哪里？魏大勋收到白宇安排的特殊任务。吴谨言、许凯、胡先煦组成新的“吴言一队”，魏大勋、范丞丞、宋铭睿组成新的“鹤顶红队”，林允和宋铭睿依旧是“蓝霸夫队”。
吴谨言、许凯曾在某热播剧中合作，两人在剧中的角色及角色之间的情感交集深受观众喜爱和追捧，“傅璎夫妇”更成为网友热议的“荧屏情侣”，话题热度持续飙升。这次两人在节目中重逢，吴谨言看见自己的老搭档便一改剧中“人狠话不多”的形象，开心到飞奔向许凯，上演“拥抱杀”，还帮许凯整理衣服，惹得众成员纷纷围观。在文武考核中，众成员需要蒙眼用沾了墨水的道具剑进行比试，许凯瞬间变身“傅恒”，身手敏捷，以一人之力连败其他队的成员，还自封“西门吹雪”，吴谨言一直在场外鼓掌欢呼“漂亮”。眼看许凯就要帮“吴言一队”取得最终胜利，吴谨言也想体验便轻声说道“我还没上呢”，许凯立马主动“让位”，让吴谨言上场。而在准备的时候，许凯更暖心地帮吴谨言戴眼罩，满屏幕都充满了大写的“甜”。在之后的任务环节中，两人之间也频频互动，为节目添加了许多感动和笑料。
相比吴谨言与许凯在节目中的暖心互动，新加入到“鹤顶红队”的魏大勋和范丞丞之间就是在“互相伤害”了。在体验鹿鸣宴环节，每队的两名成员都需要戴上眼罩，一个人吃菜，一个人喂菜，最快吃光的队伍获得一分。范丞丞表示：“我们有大勋在，肯定没有问题，像这种吃光的东西太简单了”，魏大勋见队友这么“出卖”自己，直接给范丞丞挂上围裙，让他先上场。“鹤顶红队”试吃的食物是一块很筋道的馍，为了率先完成任务，魏大勋放弃使用手中的筷子，开始“硬核喂食”，用手将馍直接往范丞丞嘴里“塞”。由于喂食场面“比较激烈”，两人都还蒙着眼睛，魏大勋的手指也不小心被范丞丞“深深地”咬了一口，疼得叫唤：“哎哟喂，他咬我的手”。第一轮结束后，范丞丞无奈苦笑，仿佛脸上写了一个大写的“崩溃”，对魏大勋放话“你怎么喂我，我就怎么喂你”，爆笑演绎“互怼兄弟情”。
“青春旅行团”此次还将会迎来一场考试，每位成员都会做一份与自己的人生导师有关的“特殊考题”，其内容囊括：“你的人生导师是谁？为什么在你心里TA能够被称作人生导师？TA的生日？TA最喜欢的菜是什么？TA的梦想是什么？”而做完考题，青春团的成员们需要带着考卷，去到各自的“解惑间”，与自己的人生导师电话连线，核对自己的答案。吴谨言连线好友，询问“我最让你生气的事？”，被好友暖心“吐槽”：“心律不齐照样熬夜”；范丞丞温情告白妈妈“最抱歉的是应该多陪陪你”；宋铭睿与段美洋面对电话那头家人的关心和爱意也纷纷落泪。而林允、魏大勋、胡先煦、许凯也将现场与演艺圈中的朋友或前辈电话连线，流露出了与以往电视屏幕上不同的一面。
黄磊、罗志祥、张艺兴、王迅将携手迪丽热巴、岳云鹏、雷佳音，全新阵容集结，从长江入海口出发，开启这一次的“长江行”之旅。在一场节目特制的迎新环节中，新老成员有了第一次“亲密接触”，而作为老成员之一的孙红雷竟惊喜“亮相”节目，开启场外应援模式。“三杯鸡”、“二锅头”、“罗丽”等新组合带来欢笑的同时，为展示“上海新时尚”拉开了一场关于垃圾分类的“闯关战”。
节目开场，黄磊、罗志祥、张艺兴以及王迅等四位老成员，一副信心满满的状态从红毯亮相，准备迎接新一季的挑战。为了迎接新人，节目组特意准备了一排奶油“礼炮”。按照《极限挑战》一贯的风格，事情可没那么简单，本以为对准了新人的“奶油礼”，竟然都喷在了老几位的脸上。反观另一边的新嘉宾们却是离了老远，嗑着瓜子、吃着芥末味蛋糕，和老成员们隔空对话。
“幸灾乐祸”却帅不过三秒，老成员们不按常理出牌，手里抓满了奶油。见状，雷佳音秒“怂”、不停喊错：“错了还不行嘛！”自此，“错了”二字，就成了他的口头禅。而岳云鹏在走向老成员的过程中，一不小心被罗志祥的奶油抹了一脸，看不清眼睛鼻子和嘴巴，连耳朵也听不见了。虽然是唯一一位女嘉宾，但节目规则一视同仁，迪丽热巴也未能幸免，奋力逃跑之后，还是接受了新人欢迎仪式的“眷顾”。
由于工作原因，孙红雷和黄渤无法全程参加《极限挑战》第五季的录制，可是两位哥哥一直都是节目重要的成员。为了弥补无法亲身来到首期节目的遗憾，孙红雷特意和街上的路人一起录制视频，为节目“应援”，大声喊出“这就是爱”！
结束了“简短而有意义”的迎新流程，回归到主题“上海新时尚”——垃圾分类。节目通过层层关卡，最终完成九宫格连线即为获胜。其中的一个环节，是“极挑团”来到滩涂，穿上工作服，拿着各种的工具，实地捡垃圾。二十分钟的时间内，“极挑团”的投入程度可见一斑，一共捡拾了一百多斤的滩涂垃圾。
由于每组成员在任务过程中，获得了不同的捡垃圾工具，“二锅头”之一的雷佳音显得有些吃力，另一旁的罗志祥轻松不少。熟悉罗志祥的朋友不难知道，节目里，他一直习惯性地喊所有人都是“哥”或者“姐”。看到雷佳音的罗志祥，不知是否想和他交流捡垃圾心得，喊了雷佳音一声，脱口而出便是“哥！你们这样好捡吗？”殊不知，遭到了雷佳音的反驳：“别叫我哥呗！”事实上，1979年出生的罗志祥确实比1983年的雷佳音大了四岁。罗志祥下意识表示“不可能”，雷佳音则见怪不怪：“怎么不可能？我只是长得老而已。”
“三杯鸡”遇“二锅头”，黄磊、王迅、张艺兴应对自如
除了滩涂捡垃圾，“极挑团”身体力行科普垃圾分类知识。扮成“垃圾桶”主动回收商场客人手中的垃圾，完成分类之后。黄磊、王迅和“三杯鸡”的另一位成员张艺兴，一起来到上海的社区街道，准备参加“垃圾分类达人选拔赛”。不成想，选拔赛的舞台上已经有了雷佳音和岳云鹏。
作为一名相声演员，岳云鹏和“首次登台”的雷佳音，一边说着相声、玩着脑筋急转弯一边普及垃圾分类小常识。“蒸羊羔、蒸熊掌、蒸鹿尾儿……菜蟒、银鱼、清蒸哈什蚂……”报完一段菜名，紧接着岳云鹏脱口而出：“这些都是厨余垃圾。”令台下的观众笑得不可开支、掌声连连。
所谓你方唱罢我登场，黄磊、王迅和张艺兴连忙上台，张艺兴弹起钢琴、王迅打着快板，默契十足。为表演顺利进行，黄磊“甘当绿叶”成了王迅的“话筒架子”。“垃圾分类就是好，资源回收废变宝……”一段数来宝表演脱口而出。